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介紹生物顯微鏡的工作原理與用途
生物顯微鏡是用來觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養(yǎng)、流質沉淀等的觀察和研究,同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等物體。
生物顯微鏡的工作原理
(一) 折射和折射率
光線在均勻的各向同性介質中,兩點之間以直線傳播,當通過不同密度介質的透明物體時,則發(fā)生折射現(xiàn)象,這是由于光在不同介質的傳播速度不同造成的。當與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時,光線在其介面改變了方向,并和法線構成折射角。
(二) 透鏡的性能
透鏡是組成顯微鏡光學系統(tǒng)的zui基本的光學元件,物鏡目鏡及聚光鏡等部件均由單個和多個透鏡組成。依其外形的不同,可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負透鏡)兩大類。當一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點,這個點稱"焦點",通過交點并垂直光軸的平面,稱"焦平面"。焦點有兩個,在物方空間的焦點,稱"物方焦點",該處的焦平面,稱"物方焦平面";反之,在象方空間的焦點,稱"象方焦點",該處的焦平面,稱"象方焦平面"。光線通過凹透鏡后,成正立虛像,而凸透鏡則成正立實像。實像可在屏幕上顯現(xiàn)出來,而虛像不能。
(三) 凸透鏡的五種成象規(guī)律
1. 當物體位于透鏡物方二倍焦距以外時,則在象方二倍焦距以內(nèi)、焦點以外形成縮小的倒立實象;
2. 當物體位于透鏡物方二倍焦距上時,則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實象;
3. 當物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),焦點以外時,則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實象;
4. 當物體位于透鏡物方焦點上時,則象方不能成象;
5. 當物體位于透鏡物方焦點以內(nèi)時,則象方也無象的形成,而在透鏡物方的同側比物體遠的位置形成放大的直立虛象。
(四)使用方法
先將低倍物鏡的位置固定好,然后放置標本片,轉動反光鏡,調好光線,將物鏡提高,向下調至看到標本,再用細調對準焦距進行觀察。除少數(shù)顯微鏡外,聚光鏡的位置都要放在zui高點。如果視野中出現(xiàn)外界物體的圖像,可以將聚光鏡稍微下降,圖像就可以消失。聚光鏡下的虹彩光圈應調到適當?shù)拇笮。钥刂粕淙牍饩€的量,整理增加明暗差。
生物顯微鏡的用途
顯微鏡的光學技術參數(shù)包括:數(shù)值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場寬度、覆蓋差、工作距離等等。這些參數(shù)并不都是越高越好,它們之間是相互又相互制約的,在使用時,應根據(jù)鏡檢的目的和實際情況來協(xié)調參數(shù)間的關系,但應以保證分辨率為準。
生物顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細胞、細菌、組織培養(yǎng)、生物顯微鏡懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細胞、細菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程等。在細胞學、寄生蟲學、腫瘤學、免疫學、遺傳工程學、工業(yè)微生物學、植物學等領域中應用廣泛。顯微鏡的重要光學技術參數(shù)在鏡檢時,人們總是希望能清晰而明亮的理想圖象,這就需要顯微鏡的各項光學技術參數(shù)達到一定的標準,并且要求在使用時,必須根據(jù)鏡檢的目的和實際情況來協(xié)調各參數(shù)的關系。只有這樣,才能充分發(fā)揮顯微鏡應有的性能,得到滿意的鏡檢效果。